100 čisti astaksanthinnalazi se u morskim organizmima poput mikroalga (hematokocus pluvialis), lososa, pastrmke, krill i škampi. Nalet u svojoj popularnosti unutar industrije hramne, kozmetičke, akvakulture i hrane i pića pokreće se opsežnim istraživanjima ističući svoje prednosti, što nadmašuje one od mnogih drugih antioksidanata poput vitamina E i - karotena. Ove prednosti uključuju borbu protiv oksidativnog stresa, smanjujući upalu, poboljšanje zdravlja kože, jačanje izdržljivosti i podržavanje zdravlja očiju. Međutim, efikasnost, sigurnost i tržišna vrijednost rasutih astaksantinskih proizvoda su intrinzično vezana za njihovu kvalitetu, čistoću i koncentraciju. Ali kako testirati astaksantin?

Važnost testiranja astaksantina

Globalna astaksantinska tržišta brzo se širi, projicirana je da dostigne milijarde dolara u narednim godinama. Ovaj rast popraćen je raznovrsnim rasponom od 100 čistih astaksantinskih proizvoda: sintetički nasuprot prirodnim, ulje - sjedištem u prahu, ekstrakti u prahu, softgele i tematičke kreme. Ova raznolikost predstavlja značajne izazove:

• Provjera potencijane:

Je li proizvod isporučuje reklamiranu dozu astaksantina?

• Procjena čistoće:

Da li je prirodni astaksanthin bez štetnih otapala, teških metala, pesticida i mikrobnih kontaminanata?

• Identifikacija stereoizomera:

Prirodni astaksanthin iz HAEMATOCOCCUS PLUVIALIS gotovo je isključivo u više bioraialni 3S, enantiomerni oblik 3. Sintetički astaksanthin, proizveden iz petrokemijskih, mješavina je tri stereoizomera (3S, 3-a, 3r, 3 i 3R, 3'r) i uglavnom se smatra niže biološke aktivnosti. Razlikovanje između njih je presudno.

• Monitoring stabilnosti:

100 Čisti astaksanthin je vrlo osjetljiv na degradaciju od kisika, svjetla i toplote. Ispitivanje osigurava da proizvod ostane jačan u svom roku trajanja.

• Autentičnost i preljuba:

Donja - sintetički astaksantiji ili drugi pigmenti mogu se koristiti za preljubne skuplje prirodne proizvode. Za otkrivanje ove prevare potrebna je sofisticirana ispitivanja.

Stoga je multi - protokol za testiranje od suštinskog značaja za 100 čistih astaksantinskih proizvođača, dobavljača i cilju - korisnicima da garantuju da rade sa istinskim, moćnim i sigurnim proizvodom. Dobavljači poput Guanjie Biotech, kao specijalizirani proizvođač rasutih astaksantina, implementira ove protokole testiranja u svakoj fazi, od sirove biomase do završetka ekstrakta, kako bi se osiguralo integritet proizvoda.

Kako to učinitiTest Astaxanthin?

Spektrofotometrija

• Princip:

Ovo je klasična, brza i troška - zasnovana na apsorpciji svjetlosti na specifičnim talasnim dužinama . 100 čisti astaksanthin ima karakterističnu apsorpciju maksimalno u raznim otapalima (npr. ~ 470-480 nm u acetonu, hloroformu ili etanolu).

• Metoda:

100 čistih astaksantinskog uzorka rastvoren je u pogodnom otapalu, a apsorbancija se mjeri pomoću UV - visine spektrofotometra. Koncentracija se izračunava pomoću piva - Lambert zakon (= εcl), oslanjajući se na unaprijed određeni molarni koeficijent izumiranja za Astaksantin (npr. A_1%^1cm≈ 2100 u etanolu na ~ 480 nm).

• Primjena:

Najprikladniji za brze, grube procjene ukupnog karotenoidnog sadržaja u sirovoj biomasu, algalnom papu ili koncentriranim uljima. Široko se koristi u - kući za praćenje procesa.

• Ograničenja:

Nedostaje na specifičnost. Mjeri ukupne kromofore (obojene jedinjenja) i ne mogu razlikovati astaksantin, njegove estere, ostalih karotenoida (poput kantaksacije ili {{1} karotena) ili razgradnje. Nije prihvatljivo za konačnu certifikaciju proizvoda ako je potrebna precizna kvantitacija.

Visoko - tečna hromatografija (HPLC)

HPLC je nedvosmislen način izbora za tačnu identifikaciju, odvajanje i kvantifikaciju 100 čistih astaksantina i njegovih različitih oblika.

• Princip:

HPLC razdvaja složenu mješavinu spojeva u uzorku na temelju njihove diferencijalne particije između stacionarne faze (stupca) i mobilne faze (otapala). Odvojeni spojevi su zatim otkriveni i kvantificirani, obično koriste dispery FOTODIODE (PDA) detektor.

• Ključne HPLC konfiguracije za Astaxanthin:

Reversed - faza HPLC (Rp - HPLC): Ovo je najčešći postavljanje. Ne - Polar stacionarnu fazu (npr. Stupac C18) i polarnu mobilnu fazu (npr. Metanol, acetonitril, voda, često s modifikatorima poput etil acetata ili dihlorometana). Odlično odvaja Astaksantin iz svojih estera (monoesteri elutiraju prije diestersa) i iz drugih karotenoida.

• Chiral HPLC:

Ova specijalizovana tehnika koristi zličku stacionarnu fazu dizajniranu za odvajanje enantiomera. To je definitivna metoda za razlikovanje prirodnih (3S, 3-a) 100 čistih astaksantih iz sintetičke smjese (3S, 3-a, 3R, 3, 3R, 3'R). Ovo je kritički test za autentičnost.

• Detekcija:

PDA detektor je vitalni kao što pruža UV - po spektra svakog vrha iz stupca. Ovaj spektralni otisak prsta omogućava pozitivnu identifikaciju uspoređujući spektar i vrijeme zadržavanja na autentičnom astaksantinskom standardu.

• Kvantifikacija:

Kvantifikacija se postiže integriranjem vršnih područja uzorka i uspoređujući ih sa krivuljom kalibracije izgrađene od certificiranih 100 čistih astaksantinskih referentnih standarda poznate koncentracije. To omogućava precizno mjerenje besplatnog astaksantina, monoesttora i diestersa pojedinačno.

Tipičan HPLC {- PDA metoda za astaksanthinove estera može koristiti:

Stupac: C18, 250 x 4,6 mm, 5 μm

Mobilna faza: gradijent otapala A (metanol: voda, 90:10) i otapala B (etil acetat) ili izokratske metode sa ternarnim otapalima.

Brzina protoka: 1,0 ml / min

Detekcija: 470 nm

Temperatura: 25 stepeni

• Priprema uzorka:

Vađenje je kritično pre - korak do HPLC-a. Ulja se mogu razrijediti direktno u odgovarajućem otapalu. Sušena biomasa ili puderi zahtijevaju strože proces ekstrakcije, često koristeći otapala poput acetona, etil acetata ili tetrahidrofuranske (thf) s perlom - premlaćivanjem ili zonama za razbijanje ćelijskih zidova i osigurati potpunu ekstrakciju.

Masovna spektrometrija (LC - MS / MS)

• Princip:

Spojni HPLC na masovni spektrometar (LC - MS ili LC - MS / MS) dodaje neusporediv sloj specifičnosti i potvrde. MS detektor identificira spojeve na osnovu njihove mase - u - omjer naboja (m / z).

• Primjena:

Potvrdna identifikacija: Omogućuje konačnu potvrdu o molekularnoj težini . 100 čisti astaksanthin ima molekularnu težinu od 596,8 g / mol. Njeni esteri će pokazati odgovarajuće veće mase (npr. Monoester sa masnom kiselinom MW 282 imala bi masu 596.8 + 282 - 18=860.8, čineći gubitak vode tokom esterifikacije).

• Otkrivanje nečistoća u tragovima:

Visoko efikasan za identifikaciju i kvantificiranje niskih nivoa drugih karotenoida, produkcije degradacije ili zagađenja koji bi mogao propustiti PDA detektor.

• Studije metabolomike:

Koristi se u istraživanju za praćenje astaksantina i njegovih metaboliti u biološkim uzorcima (krv, tkiva) za proučavanje njegove apsorpcije, distribucije i bioraspoloživosti.

Ispitivanje za nečistoće i čistoću

• Preostala otapala:

Plinska kromatografija (GC) s detektorom od plamena ili masovnim spektrometrom (MS) koristi se za otkrivanje i kvantificiranje isparljivih organskih otapala (npr. Heksane, etanol, etil acetata) iz postupka ekstrakcije, osiguravajući da su ispod sigurnosne granice postavljene od strane Farmakopoeiasa (npr. USP<467>).

• teški metali:

Induktivno povezana masovna spektrometrija u plazmi (ICP - MS) ili atomska apsorpciona spektroskopija (AAS) zaposleni su za testiranje toksičnih metala poput olova, arsena, kadmija i žive. Ograničenja su stroga, često nakon USP-a<232>/ ICH Q3D Smjernice.

• Mikrobiološko testiranje:

Standardne metode brojanja ploča koriste se za osiguravanje 100 čistih astaksantinskog proizvoda u sigurnim granicama za ukupni aerobni brojevi mikrobi, ukupnog kvasca i kalupa i odsutnosti specifičnih patogena poput E. Coli, Salmonella i Staphylococcus Aureus.

• Pesticidi:

GC - MS ili LC - MS / MS koriste se za prikaz za stotine potencijalnih ostataka pesticida, posebno važnim za algalnu biomasu koja se uzgaja u otvorenim ribnjacima.

Ispitivanje stabilnosti

Stabilnost se procjenjuje koristeći ubrzane protokole testiranja po ICH smjernicama (Q1A (R2)). Uzorci se pohranjuju u komore za stabilnost pod stresama:

• Povišena temperatura: npr. 40 stepeni ± 2 stepena

• Visoka vlažnost: npr. 75% ± 5% RH

• Izloženost svetlosti: prema ICH Q1b

100 Čisti astaksantinski uzorci povučeni su u postavljenim intervalima (0, 1, 2, 3, 6 mjeseci) i testirani prvenstveno putem HPLC-a za Astaksanthin sadržaj. Analizira se stopa degradacije kako bi se predvidio rok trajanja proizvoda pod preporučenim uvjetima skladištenja. Ovo takođe pomaže u formuliranju stabilnih proizvoda sa odgovarajućim antioksidansima (npr. Vitamin E) i ambalaže (neprozirne, nepropusne kontejnere).

Zaključak

Izuzetne zdravstvene koristi od 100 čistih astaksantina pokrenule su ga u prvi plan industrijske industrije hram i funkcionalne hrane. Međutim, ovo obećanje se može ispuniti samo ako je proizvod originalan, moćan, čist i stabilan. Ispitivanje Astaksantina, dakle, prelazi iz pukog tehničkog postupka na temeljni stup integriteta proizvoda i potrošačkog povjerenja.

Iako jednostavna spektrofotometrija ima svoje mjesto za brze provjere, HPLC - PDA je neophodan rad koji se radi za tačnu kvantifikaciju i identifikaciju. Chiral HPLC i LC - MS / MS pružaju konačan dokaz potreban za autentifikaciju prirodnog astaksantina i otkrivanje sofisticiranosti. Nadalje, sveobuhvatni režim kontrole kvalitete mora sadržavati testove za onečišćenja poput teških metala, otapala i mikroba.

Opsežna istraživanja na 100 čistih astaksantina ne samo potvrđuje svoju biološku superiornost, već pruža i naučnu osnovu za ove sofisticirane analitičke tehnike. Konačno, odgovornost za implementaciju ovog rigoroznog testiranja pada na dobavljače. Ugledni 100 čisti astaksanthin dobavljač nije samo trgovac. To je prirodni astaksantinski proizvođač koji ugrađuje stroge testiranje u cijeli proizvodni cjevovod. Guanjie Biotech je astaksanthin dobavljač. Naš proces ugrađuje rigorozne testiranje u svakoj fazi: od obrade čistog haematococcus pluvialis sojeva na nastavku u - praćenje procesa i završne vađenjem. Svaka serija gotovih rasutih astaksantinskih proizvoda podvrgava punu bateriju analize, uključujući HPLC - PDA za potenciju, GC za otapala, ICP - MS za teške metale i mikrobiološke testere. Ova posvećenost, dokumentovana u detaljnom sertifikatu o analizi (COA), garantuje kupcima proizvod koji je moćan, autentičan, siguran i stabilan.

Reference

[1] Capelli, B., Bagshaw, J., & Cygewski, GR (2013). Sintetička u odnosu na prirodni astaksanthin: pregled bioraspoloživosti i efikasnosti. CYANOTECH Corporation.

[2] Fassett, RG, & Coombes, JS (2011). Astaxanthin: potencijalni terapeutski agent u kardiovaskularnim bolestima. Morski lijekovi, 9 (3), 447-465.

[3] Hosseini, SM, Hashemi Gahruie, H., Razmjooie, M., i dr. (2020). Učinak uvjeta skladištenja na stabilnosti astaksantinskog nanoliposoma. Časopis za nauku i tehnologiju hrane, 57 (4), 1425-1434.

[4] Međunarodna konferencija o harmonizaciji (ICH). (2003). Ispitivanje stabilnosti novih supstanci lijekova i proizvoda (Q1A (R2)).

[5] Međunarodna konferencija o harmonizaciji (ICH). (2005). Dnevnosti: Smjernica za zaostale otapala (Q3C (R6)).

[6] Nishida, Y., Yamashita, E. i Miki, W. (2007). Kvalitetne aktivnosti u zajedničkim hidrofilnim i lipofilnim antioksidansima od singlet kisika koristeći sistem za otkrivanje hemiluminecence. Karotenoidna nauka, 11, 16-20.

[7] Turcato, A., Gianoncelli, A., & Ribaudo, G. (2022). Analitičke strategije za procjenu astaksantina i njenih derivata u komercijalnim proizvodima. Molekule, 27 (15), 4794.

[8] Farmakopeja Sjedinjenih Država (USP). (2022).<467>Preostala otapala. Farmakopejska konvencija Sjedinjenih Država.

[9] Farmakopeja Sjedinjenih Država (USP). (2022).<232>Ograničenja elementarnih nečistoća -. Farmakopejska konvencija Sjedinjenih Država.

[10] Yuan, JP, Peng, J., Yin, K., & Wang, JH (2011). Potencijalno zdravlje- Promovisanje efekata Astaksantina: visoko - celuju karotenoida uglavnom iz mikroalga. Molekularna ishrana i istraživanje hrane, 55 (1), 150-165.